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PCR定量檢測mtDNA損傷及拷貝數變化

2021-05-08
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線粒體是真核細胞的重要細胞器,是細胞的“動力工廠”和細胞凋亡調控的關鍵元件。哺乳動物線粒體 DNA (Mitochondrial DNA,mtDNA)是一全長為 16.5kb左右的雙鏈閉環分子。與核不同的是,線粒體基因組為多拷貝基因組。mtDNA 功能的完成既依賴於每一個mtDNA分子結構的完整性,也同時依賴於細胞中 mtDNA 的拷貝數。許多研究表明,癌症、神經退行性疾病、心血管疾病、糖尿病等疾病的發生發展與mtDNA大片段、全基因組的缺失及拷貝數變化密切相關。為更準確定量檢測mtDNA損傷和拷貝數的改變,Detroit R&D公司新推出了兩款通過PCR定量分析檢測mtDNA損傷和拷貝數的試劑盒。

 

mtDNA損傷分析試劑盒

該試劑盒可用於人、大鼠或小鼠的血液、細胞或組織。適用於由於DNA缺失和DNA鏈斷裂導致的DNA損傷。Detroit R&D的mtDNA損傷分析試劑盒隻需要少量的檢測樣本,即可快速、簡單的進行高通量分析。

 

試劑盒主要成分:

● 2×濃縮QPCR緩衝液

● QPCR 引物(正向和反向引物)

● QPCR test DNA

● 5×增強子

● RT-PCR標準品

● RT-PCR引物(正向和反向引物)

 PCR定量檢測mtDNA損傷及拷貝數變化 

左:RT-PCR標準品擴增曲線圖;   右:8.8kb mtDNA 的RT-PCR標準曲線圖

 

產品信息 

名稱

貨號

規格

Human Mitochondrial DNA Damage Assay

DD2H

40 reactions

Rat Mitochondrial DNA Damage Assay   

DD2R

40 reactions

Mouse Mitochondrial DNA Damage Assay

DD2M

40 reactions

 

 

mtDNA拷貝數定量檢測試劑盒 

該DNA分析試劑盒是利用RT-PCR方法,以核DNA (nDNA) 為基準對線粒體DNA (mtDNA) 拷貝數進行相對定量檢測。可用於檢測人、大鼠或小鼠樣本。

 

試劑盒主要成分:

● 96孔PCR板

● RT-PCR反應混合物 

● 線粒體DNA(mtDNA)引物

● 核DNA(nDNA)引物

● 陽性對照

 PCR定量檢測mtDNA損傷及拷貝數變化 

正常人與糖尿病患者視網膜mtDNA拷貝數的比較


Santos et.al. Free Radical Biology & Medicine 51: 1849-1860, 2011.

PCR定量檢測mtDNA損傷及拷貝數變化 

左:大鼠陽性對照RT-PCR擴增曲線             右:mtDNA的RT-PCR分析

 

產品信息

名稱

貨號

規格

Human Mitochondrial Copy Number Assay   

MCN1

44 reactions

Rat Mitochondrial Copy Number Assay    

MCN2

44 reactions

Mouse Mitochondrial Copy Number Assay

MCN3

44 reactions

 

近期參考文獻

1.Singh, K. et al. (2020) Developmental regression and mitochondrial function in children with autism. Annals of Clinical and Translational Neurology 7: 683-694. 

 

Mishra, J.S. et al. (2020) Testosterone decreases placental mitochondrial content and cellular bioenergetics. Biology 8L176;

 

Guo, X. et al. (2020) STAMP: a multiplex method for simultaneous evaluation of mitochondrial DNA heteroplasmies and content.

 

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名稱

貨號

規格

CSE1

96T

8-OHdG Antibody   

8OHDG

50μL

Oxidative Stress 8-isoprostane ELISA Kit

8iso1

96T

 



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